TERAPIA EPIGENÓMICO BACTERIANA

                                                   

                                    

Tema: 

Aumento de la producción de péptidos antimicrobianos catiónicos con inhibidores de histona desacetilasa como una nueva terapia epigenética para infecciones bacterianas. 

Mecanismo epigenómico tratado: modificación de histonas, específicamente las histonas desacetilasas 

Cómo se lo hizo 

Se aislado varios HDACi de fuentes naturales, mientras que otros se han sintetizado químicamente.

El número de genes afectados por el tratamiento con HDACi dependió de varios factores:

•  incluido el tiempo de cultivo
•  la concentración 
• el HDACi particular utilizado 

Regulo  la transcripción de un gen al inhibir que la enzima HDAC elimine un grupo acetilo de las colas de histonas. 

Remodelación de la cromatina que se une a los octámeros de histonas para aumentar los sitios de unión disponibles en el ADN para los factores de transcripción y otras proteínas reguladoras . 

Resultados: 

• El uso de moléculas HDACi sintéticas y naturales realizo una robreexpresión de los genes que codifican  CAMP 
• como nuevas terapias para controlar infecciones bacterianas junto con el tratamiento con antibióticos 
• inhibidores de las histonas desacetilasas  inhibió los efectos nocivos de la inflamación mediada por patógenos y el daño tisular
• inhibidores de las histonas desacetilasas  restauraron las respuestas antimicrobianas del huésped.

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA:

https://www.mdpi.com/2079-6382/4/1/44 

TÉCNICA DE EDICIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS IVU

                                                  

Las infecciones del tracto urinario (ITU) son frecuentes en mujeres con trastornos del suelo pélvico, incluidas las mujeres con incontinencia urinaria de urgencia (IUU) o las que se someten a instrumentación del tracto urinario durante la cirugía de incontinencia de esfuerzo (2)  

Tema:  Terapia genética para la disfunción del tracto urinario inferior (1)

Tipo de Edición in vivo-células somática de la vejiga(1)

Dirigido hacia   ARNm de TNFα (1)

Dirigido por  CRISPR-cas9 (1)

Vector:  VHS  (1)

Órgano a tratar Vejiga (1)

Vía de administración:  Parenteral intramuscular (1)

Resultados  a corto

• citocinas y quimiocinas como IL-2, IL-6, IL-8  están significativamente más aumentadas en el tejido de la vejiga (1)

Resultados  a mediano 

•  irritación de la vejiga (1)

Resultados a largo plazo 

•  IL-1β disminuyeron en la vejiga de la rata con cistitis inducida
•  redujo la sensación de dolor (1)

(1)Yoshimura N, Miyasato M. Terapia genética para la disfunción del tracto urinario  inferior. 2013 Disponible en:  https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23131023/ 

(2)https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4128900/

TERAPIA CELULAR PARA IVU

 

Tema: Las células progenitoras adultas multipotentes, pero no TIMP3, aumentan la conservación de tejido y reducir las complicaciones urológicas después de una lesión de la médula espinal.

Tipo de Stem Cell: células progenitoras adultas multipotentes MAPC 

Método de obtención:  se realizo una punción para la extracción de células de la médula ósea adulta

Vía de administración administración: Vía Parenteral- inyección intravenosa un día después de la LME aguda

Resultados a corto:

• infiltración de células inmunes perjudiciales
• modulación multifactorial de la cascada inflamatoria

Resultados a mediano:

• sepsis

Resultados a largo:   

• función miccional mejorada 
• conservación de tejidos 
• disminución del volumen de micción 
• aumento de la frecuencia de micción

REFERENCIA BILBIOGRAFICA

Jones J, Mac A. Las células progenitoras adultas multipotentes, pero no el inhibidor tisular de la metaloproteinasa 3 de la matriz, aumentan la conservación del tejido y reducen las complicaciones urológicas después de una lesión de la médula espinal. [Internet]. 2019 Dic [cited 2020 agosto] disponible en:   https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30251917/

RECOMBINACIÒN DE ÀCIDOS NUCLÈICOS EN LA NATURALEZA- ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL-TRANSGÉNICO ANIMAL O VEGETAL EN IVU

RECOMBINACIÒN DE ÀCIDOS NUCLÈICOS EN LA NATURALEZA

Los determinantes de la resistencia a los antimicrobianos son algunos de los elementos más importantes transportados por los plásmidos. Aunque los plásmidos pueden transmitirse a otras especies mediante conjugación sin integrarse en el ADN, a veces los plásmidos pueden integrarse en el ADN cromosómico para su replicación. Los tipos de plásmidos asociados con E. coli productora de BLEE incluyen IncFII, IncN e IncI1, entre los cuales se sabe que los plásmidos de resistencia a IncI1 contribuyen a la diseminación de BLEE tipo CTX-M en E. coli             

ADN RECOMBINANTE ARTIFICIAL

                                       

Los genes de adhesinas fimbriales (FimH, CsgA y PapG) de UPEC son factores de virulencia que contribuyen a la adhesión, invasión, y formación de comunidades bacterianas intracelulares. La generación de proteínas recombinantes a partir de adhesinas fimbriales como una sola molécula se obtiene mediante tecnología de fusión. Algunos estudios in vivo e in vitro han demostrado que las proteínas de fusión brindan una respuesta inmune eficiente y protección contra las UTI producidas por UPEC.

TRANSGÉNICO ANIMAL O VEGETAL

                                    

Los ratones knockout 3 γ derivados de los islotes en regeneración tienen una susceptibilidad a UTI grampositiva y UPEC comparable a la de los controles de tipo salvaje. Los autores identificaron previamente la ribonucleasa 7 (RNasa 7) como un péptido antibacteriano producido por los riñones y la vejiga humanos. In vivo , ratones transgénicos que expresan RNasa 7 humanizada mostraron protección contra E. coli uropatógenadesafío en comparación con los controles. Estos hallazgos sugieren que la RNasa 7 tiene potencial como marcador de pronóstico de UTI o como diana terapéutica para la protección contra la infección bacteriana. 

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: 

Lee S, Lee S J. Infección del tracto urinario adquirida en la comunidad por Escherichia coli en la era de la resistencia a los antibióticos. 2018 [cited 2020 Agus 15] Disponible: https://www.hindawi.com/journals/bmri/2018/7656752/

Pineda M, Ochoa S, Cordova A.  Infecciones del tracto urinario, inmunidad y vacunación. [Internet]. 2018[cited 2020 Agus 15] Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29658949/

Eichler T, Bender K et.al Ribonucleasa 7 Se protege al riñón y la vejiga invasivo de Uropatógena Escherichia coli infección. 2019 [cited 2020 Agus 15] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6683711/

TÉCNICA MOLECULAR EPIGENÓMICA: PCR DE miRNAs IVU

                                                   

                                                   https://www.bago.com.ec/infecciones-a-las-vias-urinarias/

                                         

            

Los niveles de expresión de miARN y ARNm relativos se determinaron por RT-PCR. En este estudio, utilizamos el huésped sustituto para mostrar que la respuesta inmune innata diferencial a las infecciones UPEC y ABU está regulada, al menos en parte, por miRNA no codificantes. Después de la secuenciación de miARN en las larvas ABU y UPEC, analizamos la expresión dependiente de la cepa de miARN nuevos y conservados, y utilizando nuestra tubería microPIECE basada en conjuntos de datos de referencia AGO-CLIP de otras especies de insectos, predijimos objetivos de miARN . Descubrimos que las infecciones ABU y UPEC pueden desencadenar la expresión de miRNA nuevos y conservados para modular la expresión de genes relacionados con la inmunidad innata

REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA

Mukherjee K,  Amsel D , Kalsy M.  Los microARN regulan la inmunidad innata contra las infecciones por Escherichia coli uropatógenas y similares a comensales en el modelo de insecto sustituto Galleria mellonella. 2020 (citado 7 de agosto 2020). Disponible en: https://www.nature.com/articles/s41598-020-59407-3

PRUEBA DE TAMIZAJE Y UNA CONFIRMATORIA

                                  

PRUEBA DE TAMIZAJE

tamizaje de bacteriuria con tira reactiva: la reducción de nitratos a nitritos puede utilizarse como un marcador altamente específico de bacteriuria (97%), con un valor predictivo positivo cercano al 94%. Otro parámetro importante es la detección de esterasa leucocitaria con la tira reactiva, que mide la producción de esta enzima en leucocitos enteros o lisados. 

PRUEBA CONFIRMATORIA 

Se deberá solicitar urocultivo para confirmar el diagnóstico de bacteriuria asintomática o cistitis que permite aislamiento de más de 100,000 UFC/ml del agente patógeno.Se extendió cuantitativamente en  (BAP) y agars MacConkey (BD Platos preparados BBL; Hi-Media)  Las muestras de orina se inocularon se extendió cuantitativamente sobre BAP, Agar. Se supuso que las unidades formadoras de colonias (UFC) / ml tenían un crecimiento significativo.

                                          

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 

Gabril G, Robeldo C, Villegas M. Aspectos microbiológicos en el diagnóstico de infecciones del tracto urinarioMicrobiological aspects in the diagnosis of urinary tract infections. sciencedirect [Internet]. 2015 [cited 2020 Agosto 01] Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0123939215000570#sec0020

 Prevención, Diagnóstico y Tratamiento de la INFECCIÓN DEL TRACTO URINARIO BAJO DURANTE EL EMBARAZO, en el Primer Nivel de Atención. (2016). GUÍA DE PRÁCTICA CLÍNICAGPC. [cited 2020 Agosto 01] Disponible en:  http://www.cenetec.salud.gob.mx/descargas/gpc/CatalogoMaestro/078_GPC_IVUenelemb1NA/IVU_E_R_SS.pdf

thapaliya J, Khadka P Técnica cuantitativa mejorada de urocultivo, una ligera modificación, en la detección de infección pediátrica subdiagnosticada del tracto urinario. Pud Med. [Internet]. 2015 [cited 2020 Agosto 01] Disponible en:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6942300/

SECUENCIACIÓN DE PRÓXIMA GENERACIÓN IVU

La secuenciación de próxima generación NGS de la región de ARNr 16S-23S proporcionará información sobre la presencia de ADN microbiano dentro de un marco de tiempo clínicamente relevante que es necesario para el tratamiento oportuno y preciso de las infecciones.Se han estudiado trastornos como las infecciones recurrentes del tracto urinario (ITU) y la cistitis utilizando 16S rRNA, Ademas, se aisló cfDNA de muestras de orina  y realizamos la secuenciación de próxima generación (NGS) , reveló la frecuente aparición de cfDNA de bacterias que permanecen sin ser detectadas en la práctica clínica actual. En muchas muestras, incluidas las de sujetos considerados clínicamente estables.

REREFENCIAS BIBLIOGRAFICAS 

Sabat, AJ, van Zanten, E., Akkerboom, V. et al. Secuenciación de próxima generación dirigida de la región de ARNr 16S-23S para la identificación bacteriana independiente del cultivo: mayor discriminación de especies estrechamente relacionadas. Sci Rep. 7, 3434 (2017). Disponible en: https://www.nature.com/articles/s41598-017-03458-6 

 Burnaham P, Dadhania D, Hevang M, El ADN libre de células urinarias es un analito versátil para monitorear infecciones del tracto urinario. 2018.(citado 25 de julio 2020); 9: 2412.Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6010457/